试验要求

苏氏凝胶贴膏质量研究

试验内容

苏氏凝胶贴膏体外释放度考察、体外吸收性能考察、安全性评价

试验要求

采用改良的 Franz 扩散池装置，用高效液相色谱法测定，以大黄素、大黄酚、 重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷为指标，考察苏氏凝胶贴膏体 外释放度和体外透皮吸收性能。观察苏氏凝胶贴膏对正常皮肤和破损皮肤的刺激性和过敏性。

试验方法

1、取处理好的透析膜，固定在透皮仪的 Franz扩散池上，在供给池的透析膜上贴供试凝胶贴膏（注意排除气泡），在接收池中加入含接收液（排除气泡）。将扩散池置（37土1）℃恒温水浴中，搅拌速度300r/min，分别在 l、2、4、8、12、24h 取出接受液，同时立即补充同体积预温37℃的接受液。取出的接受液拟按大黄素、大黄酚、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷含量测定方法 进行测定，并计算一定时间内的单位面积的累计释放量。

2、固定透皮扩散试验仪，在接受室中加入搅拌子和预温37℃的接受液。将新 鲜制备好的离体鼠皮从生理盐水中取出，固定于改良的Franz扩散池上，使皮肤角质层而向上，取固定大小凝胶贴膏贴于、于鼠皮上（注意排除气泡），接受室加满扩散介质，外夹层以37士1℃的循环水浴保温，磁力搅拌子以300r/min 的 速度搅拌，分别于2、4、6、8、12、24小时取出适量接受液，同时立即补充等体积预温37℃的接受液。取出的接受液拟按大黄素、大黄酚、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷含量测定方法进行测定，计算药物在一定时间内的单位面积累积渗透量。

3、按照《中药新药研究指南（药学药理学毒理学）》及《中药药理研究方法学》

的要求分别进行皮肤刺激性试验、过敏试验。

数据分析

采用高效液相色谱法进行含量测定，采用Image J 1.8.0、Image-ProPlus7.0进行实验图像结果的定量分析；采用SPSS25.0、graphpad prism 9.0进行数据结果的单因素方差分析。

苏氏凝胶贴膏治疗痛风性关节炎的作用机制研究

试验内容

（1）血清中炎症因子（IL-1β、IL-1、 IL-8、IL-18、TNF-α）含量；（2）关节组织中 NLRP3，IL-1β，ASC，Caspase-1 蛋白表达；（3）受试踝关节滑膜组织 TLR4、 NF-kB；（4）受试关节滑膜组织TLR4mRNA；（5）踝关节肿胀测定；（6）小鼠步态与关节炎症指数评定；（7）受试关节滑膜组织病理学观察。

试验要求

初步探明苏氏凝胶贴膏对急性痛风性关节炎NLRP3/NLR4的调控机制。

试验方法

（1）ELISA法检测血清中炎症因子（IL-1β、IL-1、 IL-8、IL-18、TNF-α）含量；（2）蛋白质免疫印迹(Western blot)检测关节组织 中NLRP3，IL-1β，ASC，Caspase-1 蛋白表达；（3）免疫组化检测受试踝关节滑膜组织TLR4、 NF-kB；（4）RT-PCR法检测受试关节滑膜组织TLR4mRNA；（5）踝关节肿胀测定；（6）小鼠步态与关节炎症指数评定；（7）受试关节滑膜组织病理学观察。

数据分析

采用Image J 1.8.0、Image-ProPlus7.0 进行实验图像结果的定量分析；采用SPSS25.0、graphpad prism 9.0进行数据结果的单因素方差分析。